維生素D2和D3都具有促進鈣的生長和沉積的作用，但是化學結構不同，維生素d2是骨化醇，而維生素d3為膽固化醇。

維生素D2的主要用于一些維生素D缺乏癥的治療與預防, 維生素D3主要是可以維持血液中的檸檬酸鹽在正常水平和防止氨基酸損失。

1、儀器設備

LC-10T高效液相色譜儀-多維自動閥切液相

2、色譜條件

色譜柱：

一維C8 色譜柱，150* 4.6* 5.0

二維PAH C18色譜柱，150* 4.6*3.0

柱溫：35 度

流動相：

一維流動相 A相水 B相乙腈-甲醇 

二維流動相 A相，乙腈水溶液，

               B相，甲醇，95%A等度

檢測波長：264nm

進樣量：20ul

3、標準品配置

維生素D2標準儲備溶液（1000mg/l） ：準確稱取50mg（精確到0.1mg）維生素D2標準品于小燒杯，用無水乙醇溶解并轉移至50ml容量瓶，定容至刻度，搖勻。

維生素D3標準儲備溶液（1000mg/l） ：準確稱取50mg（精確到0.1mg）維生素D3標準品于小燒杯，用無水乙醇溶解并轉移至50ml容量瓶，定容至刻度，搖勻。

維生素D2和維生素D3混合標準溶液中間液：分別吸取1.00ml維生素D2標準儲備溶液和1.00ml維生素D3標準儲備溶液于同一100ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，混勻。

維生素D2和維生素D3混合標準溶液使用液（1.0mg/l）:吸取10.00ml 維生素D2和維生素D3混合標準溶液中間液（10.0mg/l）用100m容量瓶中，用甲醇定容至刻度，混勻。

4、標準品圖譜