胡椒堿（piperine）是一種生物堿，分子式C17H19NO3。存在于多種胡椒屬植物果實中，為其辛辣味成分之一，但胡椒的辛辣味主要來自它的異構體佳味堿。在商品黑胡椒和白胡椒中，胡椒堿的含量為5％～9％，有時高達11％。無色單斜棱柱狀晶體。熔點130～133℃。溶于乙酸、苯、乙醇 和氯仿，微溶于乙醚。

胡椒堿是一種廣譜抗驚厥藥，對小鼠實驗性電驚厥有良好的對抗作用，對戊四氮、印防己毒素、士的寧，以及腦室內(nèi)注射筒箭毒堿、谷氨酸等引起的驚厥發(fā)作和聽源性發(fā)作，都有不同程度的對抗作用。胡椒堿對蠅類的毒性比除蟲菊高。

賽智科技利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色譜儀，經(jīng)實踐檢測可提供食品中胡椒堿的HPLC檢測方案，得出的結果準確可靠，檢出限好，適用于胡椒及胡椒制品的測定，僅供廣大用戶參考。

以下是食品中胡椒堿測定的詳細檢測方法。

1　 儀器與試劑

1.1 儀器
　　LC-10Tvp高效液相色譜儀；
　　Vertex 色譜柱　250mm×4.6mm×5μm；
　　組織搗碎機；
　　樣品篩；
　　萬分之一天平；
　　棕色圓底燒瓶，配套冷凝回流裝置。

1.2 試劑
　　甲醇：色譜純。
　　乙醇：95%（質量分數(shù)）。
　　胡椒堿標準物質：純度大于98%。
　　胡椒堿標準溶液：準確稱取10.0(精確到0.1)mg胡椒堿標準物質于10mL棕色燒杯中，用乙醇溶解，轉移至10mL棕色容量瓶中，用乙醇定容至刻度。

2　 測定原理
　　試樣中的胡椒堿用乙醇提取，用高效液相色譜紫外檢測器檢測，外標法定量。

3　 色譜條件
　　色譜柱：Vertex 色譜柱　250mm×4.6mm×5μm；          
　　流動相：甲醇+水(77+23)；
　　流速：1 mL/min；
　　進樣量：20μL。
　　檢測波長：343nm

4　 試樣溶液的制備
　　用組織搗碎機將胡椒打碎，然后用樣品篩將打碎的樣品篩過。稱取過篩的試樣0.2-0.5克，置于圓燒瓶中，加入50ml乙醇，裝上回流冷凝管，加熱至沸，保持回流3小時，冷卻至室溫后，將溶液慮入棕色容量瓶中，用乙醇少量多次沖洗抽提瓶和過濾器，洗液一并慮入容量瓶中，并加乙醇至刻度，搖勻，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾后，待液相色譜測定。

從胡椒油樹脂試樣中稱取0,05克-0.1克試料，置于100ml棕色容量瓶中，用乙醇定容至刻度，搖勻，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾后，待液相色譜測定。

5　 結果分析
　　在添加0.25g/kg-5.0g/kg范圍內(nèi)，回收率在89%-106之間，相對標準偏差小于5%。
　　色譜圖如下圖所示，其峰型較好，滿足日常檢測要求。 

胡椒堿標準色譜圖